2型登革病毒ns1基因克隆及其表达产物的生物学特性研究

目的克隆并表达2型登革病毒非结构蛋白ns1基因片段,初步鉴定重组蛋白的生物学特性。方法利用登革热2型病毒重组质粒,经PCR方法扩增出ns1全长基因片段,在pQE30表达系统中表达,表达产物用Ni柱亲和层析纯化后,用鼠抗登革病毒免疫血清对重组蛋白进行WesternBlot及ELISA鉴定。结果构建的重组质粒pQE-30/NS1,pQE-30/NS1-N,pQE-30/NS1-80-200aa和pQE-30/NS1-C经IPTG诱导,重组蛋白高效表达并纯化成功,经WesternBlot及ELISA证实重组蛋白可以被免疫血清特异识别。结论2型登革病毒结构蛋白表达载体在大肠杆菌SG13009中高效表达。纯化产物具有较强的免疫原性,为进一步研究NS1的生物学特性和血清学检测奠定了基础。