GnRH及其转运肽基因真核表达载体的构建及表达

目的构建GnRH/TRS与绿色荧光蛋白(GFP)的融合基因并表达。方法利用DNA重组技术,将GnRH/TRS片段克隆至真核表达载体pEGFP-C1转化DH5α,重组体质粒pEGFP-C1-GnRH/TRS用LipoGen脂质体进行转染至Hela细胞,核酸序列测定和Western印迹分析基因表达,激光共聚焦荧光显微镜观察活细胞内荧光布局。结果重组子pEGFP-C1-GnRH/TR成功构建。激光共聚焦荧光显微镜观察结果表明,GnRH/TRS-GFP融合基因的瞬间和稳定表达均获得了相同结果。结论GnRH/TRS-GFP融合蛋白具有GFP的自发荧光特性,且不影响GnRH/TRS分子在细胞内的正确表达。