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ISSN: 2333-9721
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核酸免疫制备鼠抗棉铃虫FK506结合蛋白的多克隆抗体

DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2014.12.023, PP. 141-146

Keywords: 棉铃虫,FK506,结合蛋白,多克隆抗体

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Abstract:

利用电注射基因导入法制备小鼠抗棉铃虫FK506结合蛋白(FKBP12)的多克隆抗体,并通过Westernblot验证抗体与抗原的特异性结合。构建重组质粒pcDNA3-FKBP12并测序验证序列的正确性,利用基因导入法将重组质粒pcDNA3-FKBP12注射到小鼠体内,免疫4次后用ELISA检测法确定抗体的效价,并对抗体的特异性结合进行Westernblot以及免疫组化检测。结果表明,小鼠抗FK506结合蛋白血清的效价达到1∶25600,Westernblot结果显示此抗血清能与融合蛋白His-FKBP12结合,免疫组化结果表明在棉铃虫3龄幼虫不同组织中FKBP12均有表达。说明电注射基因导入法制备的小鼠抗FK506结合蛋白的抗体在滴度和特异性结合方面都达到预期要求。

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