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ISSN: 2333-9721
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一种适用于RAPD分析的微量山茶DNA提取方法的建立

DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2014.12.011, PP. 67-72

Keywords: DNA,提取,RAPD,山茶,改良,CTAB方法

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Abstract:

为建立一种满足RAPD-PCR分析的简便且高产率微量山茶基因组DNA提取方法，探索了在无液氮条件下，采用简化试验步骤的改良CTAB、SDS和TritonX-100方法分别提取山茶新鲜和干燥叶片DNA，通过光谱扫描和测定DNA在波长230nm，260nm和280nm时的吸光度，比较不同DNA提取方法、材料保存方法以及材料用量对DNA提取效率的影响。结果表明，干燥叶片比新鲜叶片更适合作为DNA提取材料，改良CTAB法在提取干燥山茶DNA时纯度和产率较理想，其A260/A280值为1.595-1.736，每克叶片可得到230-295μgDNA，高质量DNA经RAPD-PCR扩增可获得清晰扩增条带。100mg干燥山茶叶片适合获得高纯度和高产率的DNA，增加材料用量可增大DNA总量，但也增加了DNA中杂质含量。

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