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ISSN: 2333-9721
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小鼠DEAF1多克隆抗体的制备及应用

, PP. 197-201

Keywords: 原核表达纯化,DEAF1,动物免疫,抗血清,抗体鉴定

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Abstract:

为研究DEAF1在小鼠胰淋巴结中的内源性表达及调控外周组织抗原基因表达的机制,将DEAF1的原核表达质粒转化至E.coliBL21中,诱导获得重组DEAF1蛋白;经尿素梯度裂解包涵体纯化获得的重组DEAF1蛋白分期免疫Balb/C小鼠,获取鼠抗DEAF1的多克隆抗血清;采用ELISA、Westernblot、免疫荧光、免疫沉淀分别鉴定其效价﹑特异性﹑敏感性和亲和力。结果表明,抗血清可与抗原发生特异性的免疫反应,可用于检测DEAF1的表达及荧光定位,抗血清与抗原有较高的亲和力。结果证明所制备的多克隆抗血清具有较高的特异性﹑敏感性和亲和力。

References

[1]  盛德乔. Deaf1的功能结构域分析和预测[J].医学分子生物学杂, 2011, 8(5):433-436.
[2]  Kodama K, Butte AJ, Creusot RJ, et al. Tissue- and age-specific changes in gene expression during disease induction and progression in NOD mice[J]. Clin Immunol, 2008, 129(2):195-201.
[3]  Yip L, Creusot RJ, Pager CT, et al. Reduced DEAF1 function during type 1 diabetes inhibits translation in lymph node stromal cells by suppressing Eif4g3[J]. J Mol Cell Biol, 2013, 5(2):99-110.
[4]  伍仙凤, 盛德乔.外周免疫耐受机制的研究进展[J].免疫学杂志, 2013, 29(8):710-714.
[5]  J.萨姆布鲁克, D.W.拉塞尔, 著, 黄培堂, 等译.分子克隆实验指南[M].第3版.北京:科学出版社, 2002.
[6]  肖琳, 薛强, 邹明强, 等.睾丸酮丛毛单胞菌ATCC11996类固醇脱氢酶3α-HSD高效表达与纯化[J].中国农业大学学报, 2013, 18(1):142-146.
[7]  李丹, 初阳, 刘雅茹, 等.人源醛酮还原酶7A2融合蛋白的纯化及其对苯代谢产物的催化活性[J].中国医科大学学报, 2013, 42(1):52-55.
[8]  邵坤彦, 彭宝玉, 叶程, 等.重组谷氨酰胺转胺酶的表达、复性及纯化[J].华中农业大学学报, 2013, 32(1):14-18.
[9]  陈勋基, 陈果, 黄全生.玉米ZmCIPK42 原核表达载体构建及蛋白纯化[J].新疆农业科学, 2013, 50(1):33-37.
[10]  Mueller DL. Mechanisms maintaining peripheral tolerance[J]. Nat Immunol, 2010, 11(1):21-27.
[11]  Yip L, Su L, Sheng D, et al. Deaf1 isoforms control the expression of genes encoding peripheral tissue antigens in the pancreatic lymph nodes during type 1 diabetes[J]. Nat Immunol, 2009, 10(9):1026-1033.
[12]  Westerberg LS, Klein C, Snapper SB. Breakdown of T cell tolerance and autoimmunity in primary immunodeficiency--lessons learned from monogenic disorders in mice and men[J]. Curr Opin Immunol, 2008, 20(6):646-654.
[13]  李敏, 马兰芝, 白杰英, 等.猴免疫缺陷病毒衣壳蛋白 p27 在大肠杆菌中的表达及纯化[J].中国比较医学杂志, 2013, 23(1):1-4.
[14]  黄鹏煌, 王泽, 田海山, 等.重组人成纤维细胞生长因子8b原核表达载体的构建和纯化研究[J].中国生物工程杂志, 2013, 33(1):14-19.

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