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ISSN: 2333-9721
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沙雷氏菌(Serratiamarcescens)Yj1的分离鉴定及菌体有机磷降解酶的分离纯化

DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.07.027, PP. 180-187

Keywords: 沙雷氏菌,Yj1,乐果,大豆卵磷脂,有机磷降解酶

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Abstract:

从大豆土壤中分离纯化得到一株具有卵磷脂和乐果降解能力的菌株Yj1，对该菌株进行鉴定、生长条件优化、酶活性鉴定以及有机磷降解酶的分离纯化。结果表明，Yj1与SerratiamarcescensWW4(CP003959.1)的16SrDNA相似度为99%。正交试验对所需培养基进行优化，得到该菌株的最佳生长条件为甘露糖、蛋白胨和pH8的组合。Yj1菌株在两种磷源条件下，菌株生长量均很低，但72h内以大豆卵磷脂为磷源时的菌体生长情况优于乐果。以大豆卵磷脂为磷源时酸性磷酸酶、碱性磷酸酶与有机磷降解酶活性明显高于以乐果为磷源时的酶活，且72h内碱性磷酸酶活性一直都高于酸性磷酸酶和有机磷降解酶。硫酸铵沉淀法结合阳离子交换层析成功从Yj1菌体中分离纯化了有机磷降解酶，SDS-PAGE结果显示纯化的蛋白为单一条带。且阳离子交换层析的提纯倍数是硫酸氨沉淀的5.303倍，硫酸氨沉淀为粗酶的1.416倍。

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