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羽衣甘蓝下胚轴农杆菌介导遗传转化体系的优化
DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.06.017
Keywords: 羽衣甘蓝 ,农杆菌侵染效率 ,潮霉素筛选压力浓度
Abstract:
以红鸥羽衣甘蓝下胚轴为试材，首先优化了不定芽分化体系，其次探讨了农杆菌介导遗传转化过程中农杆菌侵染浓度、侵染时间对不定芽分化率的影响及不定芽分化和生根过程中潮霉素B筛选压力，最后对抗性植株进行了潮霉素B筛选基因的PCR检测。结果表明，在MS+6-BA5.0mg/L+AgNO39.0mg/L培养基中不定芽分化率最高，为84.17%；农杆菌侵染浓度OD600值为0.5、侵染5min时利于遗传转化，分化率为69.17%；不定芽分化和生根过程中潮霉素B筛选压力分别为4.0mg/L和30.0mg/L；潮霉素B筛选基因的PCR鉴定结果，在预期的602bp处出现了条带，初步证明潮霉素B筛选基因已整合到羽衣甘蓝基因组中。
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