OALib Journal期刊
ISSN: 2333-9721
费用:99美元
一种从非变性聚丙烯凝胶中回收小片段DNA的方法
DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.05.011 , PP. 68-72
Keywords: 非变性聚丙烯凝胶 ,DNA小片段 ,二次PCR ,改良煮沸法 ,胶回收
Abstract:
利用高分辨率的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳是分离、纯化特异性小片段DNA的首选方法,也是开展后续多种分子生物学试验的前提。本试验比较了改良煮沸法(液氮研磨+煮沸+低温浓缩)、煮沸法及直取法回收小片段DNA,以回收样品模板进行第二次PCR扩增,结果表明:改良方法回收的DNA的纯度高,特异性好,回收率与经典煮沸法相当。在保证回收产物的特异性时,用低温浓缩法替代乙醇/醋酸钠共沉淀也具有可行性及一定的创新性。
References
[1] 赵培, 王振英, 彭永康. 琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳技术检测小麦基因组DNA RAPD 扩增产物的方法学比较[J]. 中国生物工程杂志, 2003, 23(8):96-100.
[2] Xu M, Busby SJW. Activation and repression at the Escherichia coliynf EFGHI operon promoter[J]. Journal of Bacteriology, 2009, 191(9):3172-3176.
[3] 王春, 陈琳玲, 许灿新, 等. 简便快速的PCR 产物回收方法[J]. 南华大学学报, 2005, 33(1):109-111.
[4] 高传军. 一种从聚丙烯酰胺凝胶上回收D N A 片段的简易方法[J]. 科技信息, 2009, 19:6.
[5] 章蕾, 袁玲, 刘仲华, 等. 从非变性聚丙烯酰胺凝胶中回收DNA 小片段的两种方法比较[J]. 中国农学通报, 2011, 27(7):227-230.
[6] Sambrook J, Russell DW. Molecular cloning:A laboratory manual[M] . 3rd ed. New York:Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2001:636-648.
[7] 陈亮明, 张冬林, 李志辉, 等. PAGE银染和条带回收方法的改进[J]. 中南林业科技大学学报, 2007, 27(6):163-165.
[8] 庄飞云, 茅淑敏, 娄群峰, 等. 简便实用的琼脂糖凝胶回收DNA片段方法[J]. 生物技术通讯, 2003, 14(3):202-203.
[9] 朱晓峰, 安小平, 陈锦辉, 等. 一种简便、高效、经济的从凝胶中回收DNA 的方法[J]. 生物技术通讯, 2006, 17(4):603-604.
[10] 王霞, 王烨, 李琳琳, 等. 琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳检测肠道菌群基因扩增产物的方法学比较研究[J]. 新疆医学, 2008, 38(5):136-138.
[11] Seoh HK, Tai PC. Catabolic repression of sec B expression is positively controlled by cyclic AMP(cAMP)receptor protein-cAMP complexes at the transcriptional level[J]. Journal of Bacteriology, 1999, 181(6):1892-1899.
[12] 薛仁镐, 金圣爱, 孙世孟, 等. 琼脂糖凝胶中DNA 片段的挤压回收法[J]. 生物技术, 2006, 16(3):50-51.
[13] 杨百全, 王利君, 遇长春, 等. 磁珠法回收纯化DNA 样本[J]. 中国法医学杂志(增刊), 2006(1):10-11.
[14] 朱玉君, 樊叶杨, 庄杰云. 从非变性聚丙烯酰胺凝胶回收纯化DNA 样本[J]. 生物技术通报, 2010(1):193-195.
[15] Wu Q, Wu X, Zhang X, et al. Mapping of two white stem genes in tetraploid common tobacco(Nicotiana tabacum L.)[J]. Molecular Breeding, 2014, 34(3):1065-1074.
[16] 朱丹, 王亮, 吴文, 等, 应用PCR-SSCP 印染技术检测食管癌p53 基因点突变[J]. 中华医学遗传学杂志, 1994, 11(6):354.
[17] 陈亮, 郭小玲, 马凌波, 等. 优化AFLP 阳性带回收克隆技术[J]. 生物技术, 2000, 10(4):9-11.
[18] 罗立廷, 王珏, 姚琴, 等. 一种有效回收短片段PCR产物的方法[J]. 生物技术, 2006, 16(3):47-48.
[19] 蒋安, 梁慧, 陈旭, 等. 回收琼脂糖凝胶中DNA的简便方法[J]. 生物技术通报, 2006(2):102-103.
[20] 蒋志飞. 活性自由基聚合法制备聚丙烯酰胺及其水凝胶的研究[D] . 重庆:重庆大学, 2007.
[21] 周颐, 王忆平. 从非变性聚丙烯酰胺凝胶中快速高效回收DNA 片段[J]. 生物技术通报, 2013(5):194-198.
Full-Text
Contact Us
service@oalib.com
QQ:3279437679
WhatsApp +8615387084133