Floral-dip法大豆GmDREB转录因子转拟南芥研究

DREB(dehydrationresponsiveelementbinding)转录因子通过调控下游多个抗逆相关基因的表达,能有效提高植物的抗逆性。将构建的植物高效表达载体GmDREB::pCAMBIA1304,借助优化的floral-dip法,转入模式植物拟南芥,并经潮霉素Hygromycine(40～50mg.L-1)抗性筛选得到22棵抗性植株。对抗性植株再进行PCR和GUS检测获得19颗阳性苗,阳性率为86.3%。对T1代种子进行抗性分离比例统计,有4个株系的分离比例接近3:1,符合孟德尔遗传定律,说明外源基因GmDREB在这些株系的染色体中可能是单拷贝插入。继续对上述4个株系的后代进行抗性筛选,现已得到2个纯合的转基因株系。导入的报告基因GUS组织染色检测表明,转入大豆DREB基因在拟南芥的根系和子叶中均有大量表达,并在叶脉中表达。