基于核糖体基因序列快速鉴定产脂肪酶微生物

利用含罗丹明B的橄榄油检测平板从中国各省市油污土壤中分离、筛选产脂肪酶微生物菌株,扩增细菌的核糖体基因16SrDNA序列和真菌的ITS2序列,分析核糖体基因簇DNA,并结合形态学特征从而对产脂肪酶菌株进行分子生物学鉴定。核糖体基因16SrDNA序列分析及系统发育分析表明,分离得到的产脂肪酶细菌分别属于枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)、产碱假单胞菌(Pseudomonasalcaligenes)、洋葱伯克霍尔德氏(Burkholderiacepacia)、琼氏不动杆菌(Acinetobaterjurii)、嗜麦芽窄食单孢菌(Stenotrophomonasmaltophilia)和荧光假单胞菌(Pseudomonassp.);真菌核糖体基因转录间隔区(ITS2)序列及同源性分析表明产脂肪酶真菌分别属于黑曲酶(Aspergillusniger)、白地酶(Galactomycesgeotrichum)、解脂耶氏酵母(Yarrowialipolytica)、丝孢酵母(Trichosporonguehoae)和假丝酵母(Candidasp.)。研究结果表明,核糖体基因簇的DNA分析技术为从自然界分离、鉴定产脂肪酶菌种提供了一种快速有效的手段,为产脂肪酶微生物资源开发利用奠定了技术基础。