麻疯树悬浮细胞系的建立与优化

以麻疯树无菌幼苗为外植体,研究疏松愈伤组织诱导方案及不同培养条件对麻疯树悬浮细胞生长的影响,旨在建立麻疯树悬浮细胞体系。结果表明,麻疯树疏松愈伤组织诱导的最适培养基及激素组合为:MS+2,4-D0.6mg/L+BA1.0mg/L+蔗糖30g/L,此培养基上诱导出的愈伤组织湿润松散,颜色鲜艳。接种愈伤组织进行悬浮培养的液体培养基最适激素组合为:NAA0.2mg/L+2,4-D1.0mg/L+BA0.5mg/L。初代愈伤组织适宜用于悬浮培养,摇床转速应低于120r/min为宜,这样培养的悬浮细胞分散度最高。培养基中添加500mg/L水解酪蛋白能有效地促进悬浮细胞的生长。悬浮细胞振荡培养过程中悬浮细胞生长的时间进程为起始培养的第5天前,细胞增殖十分缓慢;第5-11天期间生长迅速;第13天后基本停止生长。在上述优化培养条件下,麻疯树悬浮细胞系增长速率最快,细胞生长状态最佳。