毕赤酵母展示表达南极假丝酵母脂肪酶B

将南极假丝脂肪酶B(CALB)基因N端和C端,分别与酿酒酵母絮凝蛋白(Flo1p)絮凝结构域序列的N端(FS)和C端(FL)融合,构建成脂肪酶毕赤酵母表面展示载体KFS和KFL,并转化毕赤酵母GS115后获得重组子KFS-CALB和KFL-CALB。免疫荧光检测证实脂肪酶已展示于毕赤酵母细胞表面。甲醇诱导120h后展示酶活性分别达到286U/g干细胞和182U/g干细胞。酶的热稳定性较游离酶有较大提高,50℃孵育4h后KFS-CALB菌株的残留酶活力仍保持初始酶活力70%以上;KFL-CALB在50℃孵育2h后的酶活力也达到初始酶活力50%,远远高于游离态的CALB,其在50℃孵育0.5h后仅残留18%的初始酶活力。