北京鸭表皮干细胞的分离培养

旨在研究北京鸭表皮干细胞(epidermalstemcells，ESCs)的分离培养方法及其生物学特性。采用组织块贴壁法和酶消化法分离北京鸭表皮干细胞，对分离得到的细胞进行了免疫荧光鉴定，并进行了细胞凋亡检测与外源基因转染研究。结果表明，细胞为贴壁生长，体积小，核质比高，在显微镜下折光性强、胞体透亮。北京鸭ESCs免疫荧光检测显示，细胞表达β1integrin与K19。细胞凋亡检测结果显示，北京鸭ESCs凋亡的细胞很少，凋亡率仅为6.5%。脂质体介导pEGFP-N3、pEYFP-N1和pDsRed-N1基因转染北京鸭ESCs，转染后48-96h阳性细胞明显增多、强度增强，其中转染48h时的阳性细胞最多，转染率最高可达56%。转染细胞的形态、生长速度无明显改变，转入的荧光蛋白种类不同，转染效率也略有差异。结果显示，体外培养的细胞为表皮干细胞，其凋亡率低，并且能够应用于外源基因转染研究。