草鱼IgM的纯化、标记及检测方法的建立

通过ProteinA亲和层析法分离纯化草鱼血清中的免疫球蛋白IgM，SDS-PAGE检测产物的纯度及分子量，用纯化产物免疫兔制备多克隆抗体，并用辣根过氧化物酶标记此兔抗草鱼IgM抗体，用于检测经草鱼出血病病毒广东株（GCRV-GD108）衣壳蛋白VP4及VP5免疫草鱼后产生的抗体水平。结果表明，纯化后的草鱼IgM轻链及重链分子量分别在25kD和75kD左右，所制备的草鱼标记抗体可应用于草鱼血清IgM水平的快速检测。建立了标记抗体检测草鱼抗血清的方法，为进一步研究病原体入侵感染机制、草鱼的免疫防御机理和疫苗效果评价等提供便捷的血清学检测方法。