三种油气指示菌定量PCR方法的建立及其在油气田土壤中的初步应用

利用建立的pmoA、bmoX和alkB基因的定量PCR方法分别研究了油田和气田土壤中甲烷氧化菌、丁烷氧化菌和中链烷烃氧化菌的数量丰度，并以背景区土壤作为对照。pmoA和alkB的基因数量均随着采样深度的增加而降低了1-2个数量级。手工法提取油气田土壤DNA进行油气指示菌基因定量的结果显示，油田区和气田区土壤中pmoA和alkB基因丰度略高于背景区样品。气田区样品的bmoX基因丰度为2.75×105拷贝数/g，高于背景区和油田区土壤样品0.5-1个数量级。试剂盒提取的土壤DNA的基因定量结果表明，油田区样品pmoA和alkB基因丰度分别为3.09×104和2.56×106拷贝数/g，高于气田区和背景区土壤样品，且气田区样品bmoX基因丰度分别高于背景区和油田区样品1个数量级和0.5个数量级。结果表明3种油气指示菌的定量PCR技术的建立可为油气微生物勘探提供新的检测手段。