云南萝芙木pnae基因全长克隆及其序列分析

根据已知的其他物种PNAE酶cDNA序列设计引物，采用RT-PCR技术从云南萝芙木叶片中扩增获得pnae基因部分cDNA序列即PNAE酶基因中间大片段，再用RACE技术获得其两端序列。序列拼接得到完整的1004bp的PNAE酶基因，根据获得的序列，分析得到795bp的开放阅读框，编码264个氨基酸。序列分析显示，云南萝芙木中PNAE酶氨基酸序列与蛇根木中的该酶氨基酸序列同源性高达90%，但和其他植物物种中的PNAE酶氨基酸序列，以及其他物种间的PNAE酶氨基酸序列同源性都不高，在40%-60%之间，表明不同物种中PNAE酶氨基酸序列不具有全序列的高度同源性。进一步序列分析发现，在各植物的PNAE酶氨基酸序列中都存在两个高度保守的氨基酸区域，表明不同物种中PNAE酶存在共同的高度保守区段。