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ISSN: 2333-9721
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植物叶片基因组DNA快速提取方法

, PP. 51-57

Keywords: 基因组DNA,快速提取,细胞破碎法,PCR扩增

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Abstract:

为了满足分子生物学研究中大量植株基因需要PCR检测的需求,建立了一种无需研磨、无需有机试剂抽提的快速提取植物叶片基因组DNA的方法。通过比较基因组DNA的浓度及PCR检测结果,获得了最佳提取条件,即约50mg叶片加入150μL含1%β-巯基乙醇的TE提取液,快速破碎1min。破碎后的样品4℃13500×g离心1min,上清于-20℃冷冻后室温融解,4℃、13500×g离心1min,离心后收集的上清溶液即可用于PCR检测。整个提取过程仅需10-12min,具有样品用量小、操作简单、廉价、高效等优点。使用此方法提取的烟草、水稻、大豆、玉米、油菜和花生的基因组DNA均可用于PCR扩增,并可成功扩增长度为3244bp的基因片段。此方法提取的基因组DNA也可用于对未知基因的扩增,获得4条新的花生actin基因序列。

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