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正交试验优化八角ISSR-PCR反应体系
, PP. 65-69
Keywords: 八角 ,ISSR-PCR反应 ,正交设计 ,体系优化
Abstract:
利用正交试验设计研究TaqDNA聚合酶、DNA模板、引物（UBC886）、dNTP、Mg2+浓度5个因素对云南八角ISSR-PCR反应的影响，建立其最佳反应体系。结果表明：25μL的反应体系中5个因子的最佳水平为：Mg2+3mmol/L、TaqDNA聚合酶0.5U、DNA模板0.016ng、引物0.8μmol/L、dNTPs0.2mmol/L。PCR最佳反应程序为：94℃预变性5min；94℃变性30s，46℃退火45s，72℃延伸1min，40次循环；72℃最后延伸7min，4℃保存。
References
[1] 宁德鲁, 张雨, 陆斌, 等. 莽草酸高含量的八角优良单株选择研究[J]. 西部林业科学, 2010, 39（3）：43-46. [2] 国家林业局. 中国林业统计年鉴2011[M]. 北京：中国林业出版社, 2011：100-101. [3] 韩明跃, 宁德鲁. 云南八角生产的主要问题分析及其对策[J].西部林业科学, 2006, 35（3）：125-128. [4] 叶志敏. 我国八角育种现状及发展对策[J]. 长江大学学报, 2011, 8（10）：229-232. [5] 潘晓芳, 马锦林, 谢伟东. 八角的遗传多样性与良种选育[J]. 经济林研究, 2007, 25（2）：45-47. [6] 潘晓芳, 孙雪阳, 张振林, 等. 八角属部分种质资源的AFLP分析[J]. 中南林业科技大学学报, 2012, 32（4）：140-147, 163. [7] 陈海云, 宁德鲁, 陈少瑜, 等. 基于RAPD标记的云南23个八角优良无性系的聚类和遗传多样性分析[J]. 西部林业科学, 2013, 42（1）：53-57. [8] 周延清. DNA分子标记技术在植物研究中的应用[M]. 北京：化学工业出版社, 2005：143. [9] 孙淑霞, 李靖, 陈栋, 等. ISSR分子标记技术在桃品种鉴定中的应用[J]. 中国农学通报, 2011, 27（4）：173-177. [10] 陈海云, 吴涛, 耿树香, 等. 八角基因组DNA的提取方法[J]. 福建林业科学, 2012, 39（4）：26-29. [11] 吴涛, 陈海云, 陈少瑜, 等. 八角ISSR-PCR反应体系的建立及引物筛选研究[J]. 西部林业科学, 2013, 42（2）：8-13. [12] 邓振伟, 于萍, 陈玲. SPSS软件在正交试验设计、结果分析中的应用[J]. 电脑学习, 2009, 5：16-17. [13] 林万明. PCR技术操作和应用指南[M]. 北京：人民军医出版社, 1995：7-10. [14] 刘文倩, 方向明, 牛瑞鹤, 等. 江浙地区披针叶八角植物遗传多样性及ITS序列的分析[J]. 安徽农业科学, 2013, 41（1）：198-200, 306. [15] 唐辉, 陈宗游, 史艳财, 等. 正交设计优化地枫皮ISSR-PCR反应体系[J]. 中草药, 2013, 44（5）：610-615. [16] Newell DL, Morris AB. Clonal structure of wild populations and origins of horticultural stocks of Illicium parviflorum（Illiciaceae）[J]. Am J Bot, 2010, 97（9）：1574-1578.
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