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ISSN: 2333-9721
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尼罗罗非鱼Hepcidin成熟肽的cDNA克隆及真核表达载体的构建

, PP. 120-125

Keywords: Hepcidin,成熟肽,cDNA克隆,真核表达,毕赤酵母

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Abstract:

Hepcidin是一类由动物肝脏细胞表达,具有调节铁代谢功能并具有抗菌作用的小分子阳离子抗菌肽,富含半胱氨酸,它们在机体免疫系统中发挥了重要作用,被认为是抗生素的理想替代品。TH1-5属莫桑比克罗非鱼(Oreochromismossambicus)3种HepcidincDNA序列中的一种。参考莫桑比克罗非鱼HepcidinTH1-5的cDNA序列,以尼罗罗非鱼(Oreochromisniloticus)肝脏Hepcidin全长cDNA为模板,通过PCR扩增到编码22个氨基酸的类似于TH1-5的尼罗罗非鱼Hepcidin成熟肽片段“mTH”;通过设计含XbaI和XhoI酶切位点以及信号肽酶切位点的引物,将目的片段成功连接至pGAPZ-A真核表达载体,并转化进毕赤酵母菌GS115。经鉴定,重组真核表达载体“pGAPZ-A-mTH”已被成功构建,目的片段已整合进酵母染色体中。

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