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ISSN: 2333-9721
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黑曲霉嗜热β-甘露聚糖酶在毕赤酵母中的克隆表达及其魔芋降解产物分析

, PP. 181-186

Keywords: β-甘露聚糖酶,密码子偏好性,毕赤酵母,酶学性质,低聚甘露糖

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Abstract:

根据毕赤酵母密码子偏好性优化设计合成一段来自黑曲霉BK01的嗜热β-甘露聚糖酶基因，通过构建表达载体pPICZαA-man线性化后电转化入不同的毕赤酵母宿主，获得最佳重组菌KM71-MAN，其发酵罐发酵酶活最高达2318.85IU/mL。表达产物纯化后的分子量约为40kD，最适反应温度为80℃，最适pH为5.0。该酶在70℃（pH5.0）保温44h仍能保留43%的酶活力且在pH3.0-7.0范围内保温70h（50℃）酶活力仍能保留85%以上。利用发酵罐所产重组酶酶解魔芋胶制备甘露低聚糖，产物以甘露二糖和甘露六糖为主，甘露低聚糖得率为55.6%。该重组β-甘露聚糖酶具有良好的热稳定性和pH稳定性，在魔芋制备甘露低聚糖中具有较好的应用潜能。

 References

[1]  Dhawan S, Kaur J. Microbial mannanases：An overview of production and applications[J] . Critical Reviews in Biotechnology, 2008, 27（4）：197-216.
[2]  张婕, 赵敏.β-甘露聚糖酶的研究进展[J] . 黑龙江医药, 2011, 24（2）：248-250.
[3]  王爱华, 陶宁. 浅谈甘露低聚糖的保健功能及应用[J] . 安徽农业科学, 2006, 34（13）：3249-3250.　
[4]  杨艳燕, 李小明, 李顺意, 等. 魔芋低聚糖对小鼠血糖含量和抗氧化能力的影响[J] . 中草药, 2001, 32（2）：142-144.
[5]  徐春梅, 邬敏辰, 李剑芳, 等. 魔芋葡甘露聚糖的酶水解工艺条件[J] . 食品与生物技术学, 2008, 27（3）：121-124.
[6]  Ghose TK. Measurement of cellulase activities[J] . Pure and Appl Chem, 1987, 59（2）：257-268.
[7]  赵翔, 霍克克, 李育阳.毕赤酵母的密码子用法分析[J] . 生物工程学报, 2000, 16（3）：308-311.
[8]  王玮, 文湘华. 木质素过氧化物酶LiPH2合成基因在毕赤酵母中的表达[J] . 环境科学学报, 2009, 29（9）：1793-1799.
[9]  章如安, 杨晟, 邱荣德, 等. 巴斯德毕赤酵母表达体系研究及进展[J] . 微生物学通报, 2000, 27（5）：371-373.
[10]  Cos O, Serrano A, Montesinos JL, et al. Combined effect of the methanol utilization（Mut）phenotype and gene dosage on recombinant protein production in Pichia pastoris fed-batch cultures[J] . Journal of Biotechnology, 2005, 116（4）：321-335.
[11]  陈小兵, 乔宇, 丁宏标, 等. 里氏木霉RUT-C30内切β-甘露聚糖酶基因在毕赤酵母中的分泌表达[J] . 农业生物技术学报, 2007, 15（1）：142-146.
[12]  朱劼, 邬敏辰. 黑曲霉酸性β-甘露聚糖酶的酶学特性[J] . 食品与生物技术学报, 2007, 27（3）：21-25.
[13]  Yu HY, Sun YM, Wang WJ, et al. Purification and properties of Bacillus subtilis SA-22 Endo-1, 4-β-D-mannanase[J] . Chinese Journal of Biotechnology, 2003, 19（3）：327-331.
[14]  Qiao Y, Chen XB, Ding HB, et al. Heterologous expression and characterization of man gene from Bacillus subtilis in Pichia pastoris[J] . Frontiers of Biology in China, 2008, 3（1）：26-31.

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