苯乙醇胺A人工抗原的制备与鉴定

为合成苯乙醇胺A人工抗原，并制备出鼠源苯乙醇胺A多抗血清，采用琥珀酸酐法改造苯乙醇胺A，应用活化脂法（DCC）和碳二亚胺法（EDC）与载体蛋白相连，合成人工免疫原苯乙醇胺A–BSA和检测原苯乙醇胺A–OVA，并用紫外扫描光谱法、凝胶电泳法（SDS–PAGE）和酶联免疫吸附法（ELISA）鉴定偶联结果。结果显示，在紫外扫描光谱下，合成的免疫原在276nm处出现最大吸收峰；SDS–PAGE电泳发现，免疫原出现明显的拖尾现象；按10μg/只只的剂量免疫小鼠，共免疫4次，每次间隔3周，最后1次免疫10d后，断尾采血，经测定，得到的多抗血清的效价均达到1︰10000，且1号小鼠多抗血清的敏感性最好，半数抑制浓度IC50）为536.8ng/mL，与其他药物的交叉反应率均小于0.5%，具有很好的特异性。成功合成了苯乙醇胺A人工抗原，并得到了敏感性高、特异性好的多抗血清。