利用16SrDNA检测奶牛乳房炎5种病原菌PCR方法的建立及应用

为建立快速检测引起奶牛乳房炎5种病原菌的方法，参照GenBank发表的产气荚膜梭菌乳酸乳球菌、变形杆菌、绿脓杆菌、肠球菌序列、分别根据其16SrDNA保守序列区间设计5对引物，进行PCR扩增。结果显示：这5对引物均能针对自身菌株扩增出目的条带，且具有较强的特异性；产气荚膜梭菌、乳酸乳球菌、变形杆菌、绿脓杆菌、肠球菌菌液DNA的最低检测量分别为3.40、0.89、0.91、3.30、3.60ng/μL；对临床采集的疑似患有乳房炎的奶牛所产的牛奶样品进行检测，结果显示，与传统的细菌分离鉴定相比，新建立的方法具有灵敏、高效的特性。