蕙兰α微管蛋白基因的克隆与序列分析

α微管蛋白(TUA)基因常作为研究其他功能基因表达的内参基因。以TUA作为候选内参基因之一，依据GenBank已经公布的同源TUA基因的核苷酸保守序列，设计简并性引物，以蕙兰花蕾期的花葶为材料，提取总RNA，利用RT-PCR的方法，克隆了4条TUA基因片段。序列分析结果表明，4条TUA基因片段长度均为1205bp，编码401个氨基酸，具有TUA基因标记位点：Tubulinsubunitsalpha,beta,andgammasignature特征信号序列（GGGTGSG）。各序列之间同源性高达99.63%，经Blast分析，与水稻同源性可达86%，利用DNAMAN等生物软件推断的氨基酸，与月季、玉米、牛筋草、小麦、看麦娘和水稻TUA基因所编码的氨基酸序列同源性达98%。研究中所得到的4个基因序列是TUA基因的同源片，依次命名为CfTUA1、CfTUA2、CfTUA3和CfTUA4，GenBank登录号分别为JN177709、JN177710、JN177711和JN177712。