考马斯亮蓝法测定茶籽多糖中蛋白质含量条件的优化

为建立高效、快速测定茶籽多糖中蛋白质含量的方法,以吸光度为考察指标,通过单因素和正交试验,对采用考马斯亮蓝法测定茶籽多糖溶液中蛋白质含量的试验条件(考马斯亮蓝G-250用量、反应时间、反应温度)进行了优化。结果表明,优化后的方法为:精确吸取茶籽多糖溶液1.0mL,加入考马斯亮蓝G-250溶液(0.01%)4.0mL,以蒸馏水补至总体积为10.0mL,混匀,25℃条件下放置35min,于595nm处测定其吸光度。该方法的精密度RSD为0.506%;稳定性RSD为0.836%;重现性RSD为1.57%;样品的平均加标回收率为99.19%,RSD为0.86%,表明该方法是测定茶籽多糖溶液中蛋白质含量的有效方法。