黑曲霉果胶裂解酶基因的克隆与原核表达

根据NCBI上果胶裂解酶（PL）基因在黑曲霉基因组上的分布特点设计特异引物,通过重组PCR扩增出黑曲霉编码PL的结构基因。将PL基因连接到大肠杆菌表达载体pET-28a上,得到重组质粒pET-28a-PL,转化大肠杆菌（E.coli）BL21后,用IPTG进行诱导表达。结果表明,PL基因片段序列全长1431bp,与已知PL基因（XM001397206.2）核苷酸和氨基酸序列同源性均为99%。表达产物经12%SDS-PAGE电泳,得到了一条大小约为50kD的条带,与预期分子量相符,证明真菌PL基因在E.coliBL21中可以有效表达。