绿色荧光蛋白基因在山羊胎儿成纤维细胞中的表达

为建立稳定表达增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的山羊胎儿成纤维细胞(gFFC)株,采用组织块贴壁法培养gFFC,QIAGEN转染试剂介导转染gFFC,用G418梯度法筛选阳性细胞株。结果显示:培养的gFFC生长形态正常;24孔培养板中细胞汇合度达70%～80%时,每60μL转染液内含DNA量0.4μg和QIAGEN转染试剂3μL,每孔内加入40μL转染液时能获得最佳转染效果,在G418筛选1个月后获得抗性阳性细胞株。表明EGFP基因在gFFC中成功表达。