表皮生长因子受体反义cDNA干预喉癌细胞信号转导的实验研究

目的探讨表皮生长因子受体（EGFR）反义cDNA在体外对人喉癌Hep-2细胞信号转导的干预作用。方法以缺陷重组腺病毒为载体，构建EGFR正、反义cDNA的重组腺病毒，并在人胚肾母细胞（HEK293）中包装、纯化。将已纯化的EGFRcDNA重组腺病毒在体外转染人Hep-2喉癌细胞，采用MTT法检测重组腺病毒对Hep-2细胞的生长抑制作用、流式细胞术检测细胞周期DNA表达的变化、Westernblot方法检测Hep-2细胞内EGFR蛋白的表达。结果成功地构建并制备了高滴度的EGFRcDNA1032bp片段的正、反义重组腺病毒。同时，它们能被高效地转移到Hep-2细胞内，其中反义重组腺病毒能够抑制Hep-2细胞的增殖和EGFR蛋白的表达。结论EGFR反义cDNA能有效地干预人喉癌Hep-2细胞的细胞周期信号转导机制，从而抑制肿瘤细胞的增殖。