腺病毒介导的TRAIL基因对舌鳞状细胞癌细胞株的影响

目的探讨以凋亡基因TRAIL为靶基因，腺病毒（Ad）为载体，巨细胞病毒启动子（CMV）为启动子的重组基因治疗药物AdCMV-TRAIL诱导鳞状细胞癌细胞系TCa83凋亡的作用。方法用重组绿色荧光蛋白基因（EGFP）的腺病毒AdCMV-EGFP为对照组，转染TCa83细胞确定重组腺病毒的转染率。在细胞转染1、3、5、7d时，应用荧光倒置显微镜观察细胞形态，应用MTT检测细胞的存活率，流式细胞仪检测细胞凋亡率。以AdCMV-TRAIL为实验组转染TCa83细胞，采用RT-PCR方法检测细胞TRAIL的表达。结果AdCMV-EGFP在1000particles/cell时转染率为100%。细胞转染AdCMV-TRAIL和AdCMV-EGFP后，随时间延长细胞存活率逐渐下降，但AdCMV-TRAIL组较AdCMV-EGFP组下降更快（P<0.001）。AdCMV-TRAIL和AdCMV-EGFP均能诱导TCa83细胞凋亡，而AdCMV-TRAIL组引起细胞凋亡的程度明显比AdCMV-EGFP组大（P<0.0001）。通过RT-PCR可检测到594bp的TRAIL基因。结论AdCMV-TRAIL在体外能抑制TCa83细胞的活性，并能促进其凋亡。