骨形态发生蛋白-7真核表达载体的构建及其在MC3T3-E1细胞中的表达

目的构建一个能在MC3T3-E1细胞中表达骨形态发生蛋白-7（bmp-7）基因表达载体。方法采用RTPCR技术从人胚肾中扩增人bmp-7基因，将获得的基因定向插入pcDNA3.1（+）真核表达质粒中，测序正确后用脂质体将表达质粒转染入MC3T3-E1细胞，转染后72h提取细胞全蛋白，采用Westernblot检测BMP-7蛋白表达。结果通过基因测序表明获得的bmp-7与GeneBank登录的序列一致，构建的质粒为bmp-7/pcDNA3.1（+）质粒，Westernblot检测结果表明bmp-7基因转染MC3T3-E1后能在细胞中表达。结论成功构建能在MC3T3-E1细胞中表达BMP-7的真核表达载体。