贴壁组织块反复消化法培养新生大鼠下颌骨成骨细胞及鉴定

目的探讨经济、高效的原代新生大鼠下颌骨成骨细胞培养方法。方法将新生24hSD大鼠处死并取出下颌骨，剪碎，用改良的贴壁组织块反复消化法培养细胞，噻唑蓝（MTT）比色法检测其增殖能力，通过相差显微镜观察，用骨钙素免疫荧光染色、碱性磷酸酶染色和钙结节染色方法对所获得的细胞进行鉴定。结果MTT实验显示接种后1～3d内细胞增殖缓慢，为细胞生长适应期，第7天达到高峰，以后增长速度逐渐减慢。所培养的细胞能形成矿化结节，碱性磷酸酶染色、骨钙素染色和钙结节染色均呈阳性，具有典型的成骨细胞形态特征。结论改良的贴壁组织块反复消化法可获得大量且纯的新生大鼠下颌骨成骨细胞，所培养的细胞具有典型的成骨细胞形态和功能。