紫外检测-反相高效液相色谱法测定唾液富组蛋白5的实验研究

目的建立测定唾液中富组蛋白5的紫外检测-反相高效液相色谱法。方法将收集的唾液样品用pH2.5的磷酸盐缓冲液适度稀释后，离心，取上清液进样，于0.01μg·mL-1磷酸盐缓冲液（pH3.5）中洗脱，经反相C18柱分离，紫外检测器在276nm波长处测定其中的富组蛋白5含量。结果方法的线性范围为1.0~50.0μg·mL-1，检出限为0.12μg·mL-1，标准溶液测定保留时间和峰面积的相对标准偏差分别为0.68%和4.13%。将所建立的方法用于唾液样品的分析，获得了较为满意的结果，样品测定的相对标准偏差为4.41%，加标回收率为88.4%~109.0%。结论紫外检测-反相高效液相色谱法准确快速，样品处理简单，15min内可完成1次分析周期，适用于唾液中富组蛋白5的快速检测。