牙周膜肌成纤维细胞功能特点的体外研究

目的体外实验研究牙周膜肌成纤维细胞（MFB）的作用特点。方法体外培养人牙周膜成纤维细胞（hPDLFs），采用转化生长因子-β1（TGF-β1）诱导成纤维细胞向MFB转化。MFB为实验组，以hPDLFs为对照，连续培养两组细胞，按0、12、24、48、72h共5个时间点终止培养收样。免疫细胞化学检测MFB标记物α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达情况，检测实验组纤维粘连蛋白（FN）以明确细胞间接触作用情况。逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测α-SMAmRNA、胶原（Col）ⅠmRNA、ColⅢmRNA的表达情况，免疫印迹法检测α-SMA、ColⅠ蛋白的表达情况，用以比较两组细胞分泌细胞外基质情况。结果实验组α-SMA持续稳定表达，从0h开始表达均显著高于对照组（P<0.001）；细胞间FN阳性表达，提示MFB之间有细胞突触相互连接。从24h开始，实验组ColⅠ、ColⅢ的表达均显著高于对照组（P<0.001）。结论牙周膜MFB持续高表达α-SMA并且可能通过FN相互作用。MFB具有大量分泌细胞外基质的能力。