人胰高血糖素样肽-1串联体的克隆及其表达

为大量获取人胰高血糖素样肽-1，利用基因串联的方法构建了人胰高血糖素样肽-1的一组串联体.将化学合成的人胰高血糖素样肽-1（humanglucagonlikepeptide-1,hGLP-1）cDNA基因插入质粒载体pET-32a(+)中，构建成硫氧还蛋白（thioredoxin）及六聚组氨酸（hexahistidine）与rhGLP-1的融合表达载体pET32-GLP-1.在此基础上将该融合基因序列进行同向串联，获得二串和三串的表达载体pET32-GLP-1-2和pET32-GLP-1-3.将该三种表达载体转化大肠杆菌BLR(DE3)后获得相应的基因工程菌.结果表明：三种基因工程菌经发酵和IPTG诱导后均正确表达目的蛋白，目的蛋白表达量随着基因串数的增加而得到一定提高，重组蛋白经分离纯化后进行生物学活性测试具有明显的降低血糖浓度作用.