褐藻酸裂合酶的研究Ⅰ.酶的分离提纯及动力学

朝鲜花冠小月螺的内脏提取液,经盐析透析、DEAE纤维素柱层析,分离得三个酶峰,分别称之酶Ⅰ、酶Ⅱ和酶Ⅲ.再经SephadexG-25凝胶过滤,得三种较纯的酶,最大提纯了73倍.对三种酶的动力学性质分别进行试验,最适pH:酶Ⅰ为7.6±0.02Tris-HCl缓冲液,酶Ⅱ为6.6±0.02Na2HPO4-NaH2PO4缓冲液,酶Ⅲ为5.6±0.02HAc-NaAc缓冲液.在试验浓度范围内,KCl和NaCl对三种酶都是激活剂;MnCl2对三种酶都是抑制剂;MgCl2对酶Ⅰ和酶Ⅱ为激活剂,高浓MgCl2对酶Ⅲ为抑制剂;Pb(OAc)2对三种酶的作用不同.三种酶的Km值依次为0.2、0.6和0.04mg/ml.