利用反义基因沉默策略构建水稻突变体库及突变体筛选

尝试利用鸟枪反义基因沉默策略构建水稻突变体库．利用水稻反义cDNA文库转化粳稻品种中花11，获得了来源于105块潮霉素(Hm)抗性愈伤组织的1486个转化植株．随机选择来源于11个独立转化系的335个T0植株进行Hm离体叶片筛选，结果表明所有植株均呈抗性，并且与PER检测结果相吻合，说明T0植株中不存在假转化体．Southernblot分析结果表明T0植株大部分为单位点整合．T0及T1代转化植株均呈现了一些形态变异，如矮化、无分蘖或多分蘖、结实率降低、粒型或穗型改变、小穗结构改变等．利用Hm离体叶片筛选法对部分T1群体进行筛选，得到了1个变异性状与Hm抗性共分离的突变体，该突变体的变异表型为结实率比非转化对照下降约50％，每穗颖花总数比对照减少约40％，二者的总效应导致突变体单穗产量比对照约下降70％．