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华南农业大学学报 2004
鸡γ干扰素基因在毕赤酵母中的分泌表达DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2004.03.028, PP. 105-108 Keywords: 鸡γ干扰素基因毕赤酵母基因表达抗病毒活性 Abstract: 为了获得高效分泌表达ChIFNγ的重组毕赤酵母菌株,利用基因工程技术,将435bp的ChIFNγ成熟肽编码基因亚克隆到巴斯德毕赤酵母Pichiapastoris表达载体PPICZαC中,将该重组质粒用BstXⅠ线性化并通过电击法转化毕赤酵母X-33菌株,用500μ/mL抗生素Zeocin筛选高拷贝阳性重组菌.甲醇诱导表达的重组ChIFNγ经SDS-PAGE电泳,可在相对分子质量约2.0×104处检测到目的蛋白带,目的蛋白占酵母表达上清液总蛋白质的35％.微量细胞病变抑制法检测表达产物的生物学活性,检测结果表明,巴斯德毕赤酵母表达的重组ChIFNγ的抗病毒效价为6400U/mL.
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