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ISSN: 2333-9721
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转天蚕素AD(CAD)基因于紫花苜蓿的研究

DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2012.04.014, PP. 498-502

Keywords: 紫花苜蓿,抗菌肽,天蚕素AD,转基因

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Abstract:

为了探索利用紫花苜蓿Medicagosativa作为生物反应器生产杂合抗菌肽天蚕素AD(CecropinAD,CAD)的可行性,通过PCR搭桥方法合成了CAD全长基因,并插入对外源基因表达有一定促进作用的调控元件:Ω序列、Kozak序列及KDEL四肽序列,然后将改造后的CAD基因克隆进载体pCAMBIA1390R,构建了pCAMBIA1390RCAD植物表达载体.将重组质粒转入根癌农杆菌AgrobacteriumtumefacienLBA4404,并通过农杆菌介导方法将CAD基因转化入紫花苜蓿.在含潮霉素(20mg/L)的筛选培养基上筛选转基因植株,通过PCR、Southernblotting检测,CAD基因已经转入紫花苜蓿中;提取蛋白质进行抑菌活性研究,结果表明转基因苜蓿蛋白提取物对沙门氏菌Salmonella及金黄色葡萄球菌Staphylococcusaureus具有一定抑菌活性.

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