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华南农业大学学报 2006
H9N2禽流感病毒HA全长基因的高效可溶表达及免疫原性研究DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2006.03.026, PP. 93-96 Keywords: 禽流感病毒,HA基因,高效可溶表达,免疫原性 Abstract: 采用RT-PCR方法扩增了H9N2亚型禽流感病毒(AIV)广东株的血凝素基因HA.将HA基因克隆到笔者所设计的原核表达载体pMBX上,成功构建重组表达质粒pMBX-HA.将其转化到E.coliBL-21感受态细胞中表达,经SDS-PAGE可检测到相对分子质量约为96200的融合蛋白,表达产物占菌体总蛋白的29.5%.经蛋白可溶性分析看出,融合蛋白90%以上是以可溶形式表达的.Western-blot证实,可溶表达的融合蛋白与H9N2AIV阳性血清具有良好的免疫反应性.将可溶表达的融合蛋白用体积分数为50%的Ni-NTA树脂过柱纯化,用融合蛋白作抗原,通过ELISA方法,能特异性地检测出禽流感阳性血清.
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