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华南农业大学学报 2007
应用半套式RT-PCR技术诊断番鸭呼肠孤病毒病DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2007.02.027, PP. 107-109 Keywords: 半套式RT-PCR,诊断,番鸭呼肠孤病毒,应用,半套式,技术诊断,番鸭,呼肠,病毒,Disease,Reovirus,Duck,快速检测,符合率,分离,疑似病例,临床,人工感染,核酸,检测灵敏度,方法,细胞培养物,特异片段 Abstract: 参考GenBank中番鸭呼肠孤病毒(muscovyduckreovirus,MDRV)S1基因序列设计并合成3条引物C1、HP11和HP12,组成半套式RT-PCR,扩增片段为300bp.应用该半套式RT-PCR对MDRV、禽呼肠孤病毒(ARV)、番鸭细小病毒(MPV)、鹅细小病毒(GPV)、鸡胚成纤维细胞(CEF)和番鸭胚成纤维细胞(MDEF)培养物进行扩增.结果仅能从MDRV中扩增出300bp特异片段,而不能从ARV、MPV、GPV、CEF和MDEF细胞培养物中扩增出特异片段;该方法检测灵敏度为1fg核酸,重复性好.对人工感染和临床疑似病例用病毒分离和半套式RT-PCR进行检测,2种方法符合率为100%.因此,该半套式RT-PCR可以用于番鸭呼肠孤病毒病的临床快速检测.
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