|
|
华南农业大学学报 2008
鸭白细胞介素-2基因克隆、原核表达及生物学活性检测DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2008.04.027 Keywords: 鸭,白细胞介素-2,基因克隆,原核表达,生物学活性 Abstract: 根据GenBank发表的鸭白细胞介素-2(IL-2)基因序列设计并合成了特异性引物,以经ConA诱导的广州白鸭外周血淋巴细胞提取的总RNA为模板,用RT-PCR方法扩增出长度为360bp的目的基因片段.将该基因克隆到pMD18-Tsimplevector上,经酶切、PCR鉴定及序列测定,结果表明获得了鸭IL-2成熟蛋白基因的完整克隆.构建的表达质粒pET-IL-2经BamHI、XhoⅠ双酶切鉴定构建正确;经SDS-PAGE分析,在约33000处出现新的蛋白条带,Western-blotting分析表明,融合蛋白能够被抗His单克隆抗体识别,体外活性检测表明,重组蛋白具有促进淋巴细胞增殖的活性.
|
