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华南农业大学学报 2009
香蕉线条病毒ORFⅠ基因的原核表达及抗体制备DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2009.03.078 Keywords: 香焦线条病毒,ORFⅠ,原核表达,抗血清 Abstract: 利用PCR方法从含香蕉线条病毒广东分离物(BSV-GD)部分基因组的质粒中扩增该病毒的ORFⅠ基因,将其克隆到pET-28b(+)原核表达载体中进行了融合表达.SDS-PAGE电泳发现,目的融合蛋白与预期大小一致,相对分子质量约为23000,表达产物主要以不可溶的包涵体形式存在,将其变性溶解后利用N端的组氨酸标签进行纯化.以纯化产物为抗原免疫兔子制备了香蕉线条病毒的阳性兔抗血清,Westernblot和ELISA分析表明,制备的兔抗血清为香蕉线条病毒的高效特异性抗血清,效价高达1:51200.
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