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ISSN: 2333-9721
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杂色鲍Fosmid基因组文库构建与血蓝蛋白基因筛选

DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2012.02.016, PP. 192-196

Keywords: 杂色鲍,Fosmid,基因组文库,血蓝蛋白,文库筛选

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Abstract:

以杂色鲍Haliotisdiversicolor肌肉组织为材料，按照CopyControlTMFosmidLibraryProductionKit中方法构建了杂色鲍Fosmid全基因组文库.从文库中随机挑取50个克隆进行NotⅠ酶切鉴定发现，阳性率达到100%，插入片段大小分布在32~48kb之间，平均长度约37.6kb.随机挑取8个克隆进行正、反向末端测序，获得了全部16个测序结果，其中8条序列确定为鲍来源基因序列.进一步根据杂色鲍血蓝蛋白（Hemocyanin）基因3′端序列设计特异引物，用PCR方法对基因组文库进行筛选，获得一个阳性克隆，经Primer-Walking测序、Blast比对和进化分析证实,该序列为杂色鲍血蓝蛋白Ⅱ型基因克隆.

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