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华南农业大学学报 2013
介导分泌表达猪圆环病毒2型Cap蛋白的重组杆状病毒的构建DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2013.04.021, PP. 564-568 Keywords: 猪圆环病毒2型,ORF2基因,EGT信号肽,Cap蛋白,重组杆状病毒 Abstract: 应用杆状病毒表达系统，将猪圆环病毒2型ORF2基因插入供体质粒pFastBacTMDualpH启动子控制下的多克隆位点，引入EGT信号肽取代ORF2原有核定位信号肽以实现在昆虫细胞中分泌型表达，并在C端融合6个组氨酸标签以便于后期的纯化.将构建质粒转化DH10Bac感受态细胞获得重组穿梭载体，提取重组Bacmid质粒.将阳性重组Bacmid质粒转染Sf9昆虫细胞，72h收集培养上清液获得重组杆状病毒.间接免疫荧光试验和Western-blot表明，该重组杆状病毒可以在昆虫细胞实现猪圆环病毒2型Cap蛋白的分泌表达.
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