|
华南农业大学学报 2013
不同逆转录载体系统应用于水牛胎儿成纤维细胞转基因的探索DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2013.04.020, PP. 558-563 Keywords: 逆转录病毒载体,转基因,水牛,胎儿成纤维细胞 Abstract: 采用2种不同的逆转录病毒载体系统(pMX和pMSCV),构建携带绿色荧光蛋白(EGFP)基因的重组载体,探索能高效感染水牛胎儿成纤维细胞(BFFs)的病毒系统和感染方法.结果发现,2种逆转录病毒系统包装出的重组病毒滴度都能达到106,将pMX病毒系统生产的重组病毒经超速离心浓缩后,滴度可达到107;2种重组病毒都能感染BFFs,但pMX系统比pMSCV系统更能有效地感染BFFs;通过对病毒的感染方式进行比较,发现使用新鲜病毒连续感染BFFs2次(每次间隔12h),或者经过超速离心浓缩后的病毒感染BFFs1次,可以显著提高感染效率.
|