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华南农业大学学报 2013
猪圆环病毒2型ORF1和ORF3T淋巴细胞抗原表位的克隆与原核表达DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2013.01.019, PP. 93-97 Keywords: 猪圆环病毒2型,T淋巴细胞抗原表位,克隆,原核表达 Abstract: 根据Stevenson筛选出来的3个具有活性的T淋巴细胞抗原表位(Tlymphocyteepitope,TCE)合成tce基因(180bp),成功插入到pMD18-TSimple载体中,筛选获得重组质粒,命名为pMD-TCE.将tce酶切产物亚克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,获得重组质粒,命名为pET-TCE.用IPTG进行诱导表达,收集菌液进行SDS-PAGE检测,结果显示合成基因在pET-32a(+)中获得了高效融合表达,其表达蛋白相对分子质量约为25000,Western-blot分析结果表明,获得的融合蛋白可与猪圆环病毒2型(PCV2)阳性血清发生特异性反应,具有良好的免疫原性.
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