春大豆花芽cDNA文库的构建及质量分析

【目的】为了解大豆多荚、多粒相关基因的调控机制，构建了大豆花芽cDNA文库，根据要求初步鉴定了所构建文库的质量.【方法】以大豆吉农18突变体的幼嫩花芽为材料提取总RNA，采用SMART技术合成双链cDNA.经蛋白酶K的消化及SfiⅠ酶切后，将所得cDNA克隆到λTriplEx质粒载体中，成功构建了大豆花芽全长cDNA文库.【结果和结论】将初始文库经扩增后保存，检测扩增文库滴度为2.13×108pfu/mL，重组率接近95.3%，菌落PCR鉴定插入片段主要分布在0.5~2.0kb.插入片段平均大小在1.0kb左右.表明本研究所构建的文库既满足了目的基因的分离筛选，又可保证全长cDNA文库的获得，该文库的构建为进一步开展相关基因的克隆及分子生物学研究奠定基础.