犬乳腺上皮细胞的分离培养与鉴定

【目的】建立方便、经济的犬乳腺上皮细胞体外培养方法，用于犬乳腺癌的研究.【方法】以新产犬乳汁为材料，离心并收集乳汁中细胞,进行分离培养.用CCK-8法绘制细胞生长曲线，细胞角蛋白8免疫荧光染色鉴定上皮细胞.【结果和结论】试验材料培养后第3天即可见岛屿状的细胞克隆并伴有少量吞噬细胞.继续培养至单克隆细胞汇合后，可见细胞呈典型的石铺路状，单层平铺生长，且在细胞表层产生乳滴，细胞传代后吞噬细胞消失.CCK-8结果显示，细胞生长曲线呈“S”型.细胞免疫荧光结果显示，细胞角蛋白8呈阳性.表明从犬乳汁中可以分离培养出高纯度、生长迅速的犬乳腺上皮细胞.本试验建立了短时间内获得大量纯犬乳腺上皮细胞的方法.