木尔坦棉花曲叶病毒SYBRGreenI实时荧光定量PCR检测方法

【目的】木尔坦棉花曲叶病毒CottonLeafCurlMultanVirus（CLCuMV）是为害锦葵科植物的重要双生病毒之一，本研究的目的是建立CLCuMV定量检测方法，为进一步研究其在寄主植物内的增殖动态、在介体昆虫内循环和其与寄主、介体间互作机制提供技术手段.【方法】以纯化的含CLCuMV基因组的质粒为模板，利用SYBRGreenI荧光定量PCR对不同浓度的质粒样品进行CLCuMV扩增，制作标准曲线.依照建立的标准曲线，计算烟粉虱Bemisiatabaci及朱槿Hibiscusrosa-sinensis中CLCuMV的含量.【结果和结论】该定量检测法可检测到低浓度（5.2×101μL-1)的CLCuMV，其灵敏度是常规PCR的10倍，可被用于在寄主植物和介体昆虫体内CLCuMV的定量检测.