龙眼果实发育过程中果糖激酶活性及其基因表达分析

【目的】以石硖龙眼Dimocarpuslongancv.shixia为材料，研究了龙眼果实在发育过程中假种皮蔗糖、葡萄糖和果糖含量的变化规律，以及果糖激酶活性及其基因的表达变化情况.【方法】利用高效液相色谱测定果实糖含量变化；RT-qPCR测定基因表达变化量；构建原核表达载体，并在大肠埃希菌EscherichiacoliRosetta（DE3）中进行表达.【结果和结论】随着龙眼果实的发育，假种皮中蔗糖、葡萄糖和果糖的含量逐渐增加，但进入成熟期后，糖含量水平趋于稳定；在果实成熟前，果糖激酶活性随着果实发育逐渐降低，由发育最初的25.97μmol·g-1·h-1下降到13.18μmol·g-1·h-1，而在成熟时增大到22.44μmol·g-1·h-1；荧光定量分析显示，龙眼果糖激酶基因的表达量在果实发育前期变化不大，而在假种皮迅速膨大、含糖量迅速上升时期则呈下降趋势；SDS-PAGE结果表明，成功构建了pET-32a-DlFRK原核表达载体，经IPTG诱导能够在大肠埃希菌中得到高效表达.