棉花遗传转化和植株再生的研究

利用农杆菌〔GUS基因（β-葡萄糖苷酸酶基因）为标记基因，NPTⅡ为选择基因〕，用共培法对棉花下胚轴切段直接转化。在0.1mg/L2,4-D和0.1mg/LKT的MS培养基上共培48h,转移到加头孢霉素500mg/L和50~100mg/L卡那霉素的上述培养基中诱导和筛选抗性愈伤组织，70~80天计算愈伤组织的诱导频率，并用组织化学定位法检测GUS基因的表达，统计转化频率。结果表明：平均出愈率为40%左右，最高达60%以上。愈伤组织转化率平均为30%左右，最高达70%.再生植株转化频率一般在30%左右，最高达60%.中国农科院生物技术中心和中国科学院遗传所对DNA分子杂交检测结果，证实BT基因已整合到转化棉株的基因组中，且遗传给后代植株